产品与特点

本产品是基于探针法荧光定量PCR原理研发的检测试剂盒，具备以下特点：

一、即开即用

用户仅需提供样品DNA模板，无需复杂的准备过程。

二、高灵敏度

经过优化的引物和组分使得本产品具备较高的灵敏度。

三、阳性对照

配备阳性对照元素，便于识别假阴性样品。

四、高特异性

本产品的引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区域，不会与其他生物样本的DNA发生交叉反应。

五、定性与定量检测

支持定性和定量检测，定量检测时线性范围可达至少5个数量级。

六、反应次数

提供足够的试剂支持50次20μL的探针法荧光定量PCR反应。

七、科研用途

本产品限于科研使用，不用于临床诊断。

方法详述：

DNA提取（样本制备区）

使用自选的方法提取和纯化样本DNA，本试剂盒与市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。

稀释标准曲线样品（样本制备区）

由于阳性对照浓度较高，请在独立区域进行稀释，以避免污染样品或其他试剂。

1. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
2. 在每个管中加入45μL DEPC-H2O，建议使用带芯枪头。
3. 在7号管中加入5μL 1×10E8拷贝/μL的阳性对照，混匀后得到1×10E7拷贝/μL的标准曲线样品，并将其放置在冰上待用。
4. 逐步稀释至6个稀释度的标准曲线样品。

试剂配制（试剂准备区）

若有N个待检样品，准备N+2个qPCR管（N个待检样品+1个阴性对照+6个阳性对照）。向各PCR管中分别加入所需成分（详细说明书可向我司索取）。

添加模板（模板添加区）

在qPCR管中加入2μL模板，依次为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品模板、婴儿利什曼虫qPCR阳性对照，离心30秒，立即进行扩增反应。

扩增反应（扩增及产物分析区）

将PCR管放置于PCR扩增仪器中进行扩增，具体扩增程序详见说明书。

结果分析

若有标准曲线，阳性对照以Ct值绘制标准曲线，从中推算样品DNA浓度。未制作标准曲线时，按照以下标准判定结果：

• 阳性对照：Ct值<30，呈现明显的S型曲线；
• 阴性对照：Ct值为38或无Ct值，无明显增长期；
• 样本检测结果含Ct值<35则为阳性，Ct值38或无Ct值则为阴性。

运输与保存：低温运输，-20℃保存，有效期为一年。阳性对照需单独放置，避免污染其他试剂。

选择ag尊龙凯时，为您的生物医疗研究提供可靠的试剂和技术支持。